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食品中金黃色葡萄球菌(定量)檢測的能力驗(yàn)證

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2023-03-23
核心提示: 一、能力驗(yàn)證的目的 開展能力驗(yàn)證試驗(yàn)是檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室檢測能力和提高檢測水平的重要手段。利用實(shí)驗(yàn)室間的比對(duì),對(duì)實(shí)驗(yàn)室
 一、能力驗(yàn)證的目的

 

開展能力驗(yàn)證試驗(yàn)是檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室檢測能力和提高檢測水平的重要手段。利用實(shí)驗(yàn)室間的比對(duì),對(duì)實(shí)驗(yàn)室的校準(zhǔn)或檢驗(yàn)工作進(jìn)行判定。目的是為了實(shí)現(xiàn)確定某個(gè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行某些特定檢測或測量能力,以及監(jiān)控實(shí)驗(yàn)室的持續(xù)能力。

 

二、能力驗(yàn)證步驟


1、前期做好充足的準(zhǔn)備工作,根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn),盡可能制定一個(gè)檢驗(yàn)檢測的方案,以便保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2、樣品來源:2瓶不同的真空西林瓶裝白色凍干粉末樣品

3、樣品處理

樣品儲(chǔ)存:-15℃以下冷凍保存

樣品活化步驟(建議):-20℃~ 4℃(30min),然后室溫(30min),接著樣品再水化(盡量減少大范圍溫度變化對(duì)待測樣品的影響)。

樣品再水化:一般能力驗(yàn)證樣品以國體粉末形式發(fā)放,以液體(CFU/mL)形式出報(bào)告。樣品再水化前一定要認(rèn)真、仔細(xì)閱讀作業(yè)指導(dǎo)書,無特殊規(guī)定,本次水化后的樣品40mL為待測原液。

4、方法選擇國標(biāo)第二法

5、B-P平板計(jì)數(shù)(20 CFU ~200 CFU)

(1)1號(hào)樣品:37℃,培養(yǎng)48h

100稀釋(接種量0.3mL,0.3mL,0.4mL)

 

 

1000倍稀釋(接種量0.3mL,0.3mL,0.4mL)



(2)2號(hào)樣品:37℃,培養(yǎng)48h

10稀釋(接種量0.3mL,0.3mL,0.4mL)


 

100稀釋(接種量0.3mL,0.3mL,0.4mL)



平板涂布不是很好,有少部分菌落跑到了平板邊緣處,對(duì)于計(jì)數(shù)會(huì)有些影響。大家在該操作過程中涂布棒盡量不要接觸平板邊緣。

 


注意事項(xiàng):

a.B-P瓊脂平板制作:盡量在試驗(yàn)前一天制作好,當(dāng)天制作平板得出的結(jié)果與之相差較大,原因可能是平板涂布時(shí)沒有完全干燥導(dǎo)致的。

b.梯度稀釋(25mL+225mL):是關(guān)鍵步驟,必須盡可能地減少誤差(新手建議渦旋混勻,渦旋時(shí)間不宜過長,長時(shí)間離心力等作用下,微生物細(xì)胞可能死亡)。

c.涂布:盡可能涂布均勻,不要接觸平板邊緣,避免菌落疊在一起,而導(dǎo)致無法計(jì)數(shù)。

 

 

 


 

 


 

6、血平板(溶血觀察)



(1)1號(hào)樣品溶血情況(正反面)挑取平板5個(gè)菌落進(jìn)行試驗(yàn)(只列出前三個(gè)菌落結(jié)果)



(2)2號(hào)樣品溶血情況(正反面,只列出前三個(gè)菌落結(jié)果)  



   


7、血漿凝固酶試驗(yàn)   

(1)營養(yǎng)瓊脂斜面和BHI肉湯



 

(2)血漿凝固酶試驗(yàn)(凍干兔血漿:青島海博)

 

1號(hào)樣品:


   


2號(hào)樣品:


 


7、鏡檢   

(1)1號(hào)樣品



(2)2號(hào)樣品


 

8、 能力驗(yàn)證結(jié)果


作者:StreamCHC

編輯:songjiajie2010

 
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關(guān)鍵詞: 能力驗(yàn)證
 

 
 
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