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許多細(xì)菌自細(xì)胞內(nèi)長(zhǎng)出一至許多根細(xì)絲狀附屬物稱為鞭毛.鞭毛是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官,有鞭毛的細(xì)菌均可運(yùn)動(dòng).鞭毛細(xì)長(zhǎng)透明,其寬度在普通光學(xué)顯微鏡波長(zhǎng)檢驗(yàn)范圍之外,所以不易觀察.但是在不染色情況下可以檢測(cè)到細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)推斷鞭毛的存在.
【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/div>
學(xué)習(xí)并掌握鞭毛染色的原理和方法.
【實(shí)驗(yàn)原理】
細(xì)菌的鞭毛非常纖細(xì),直徑一般在20nm左右,用電鏡才能觀察.本實(shí)驗(yàn)采用特殊染色法,即在染色前先經(jīng)媒染劑處理,媒染劑吸附在鞭毛上,使鞭毛加粗,便可達(dá)到普通光學(xué)顯微鏡的辨析范圍以內(nèi).染色后,即可利用普通光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察.
【實(shí)驗(yàn)材料、藥品及器具】
1、菌種 培養(yǎng)18-24h的菌種
大腸桿菌(Escherichia coli)
普通變形桿菌(Proteus Vulgaris)
熒光極毛桿菌(Pseudomonas fluorescens)
2、染色液 鞭毛染色液甲
鞭毛染色液乙(實(shí)驗(yàn)前配好的新鮮染液)
3、器皿 顯微鏡、酒精燈、洗瓶裝蒸餾水、香柏油、二甲苯、擦鏡紙、吸水紙、干凈載玻片、玻璃缸、無(wú)菌水三管、滅菌長(zhǎng)滴管三支.
【實(shí)驗(yàn)步驟】
1、用長(zhǎng)滴管取無(wú)菌水輕輕移入長(zhǎng)好菌種的試管內(nèi),培育20-30min使細(xì)菌自己慢慢游入水中并充分舒展其鞭毛,使水呈輕度混濁.
2、取一滴菌懸液滴于玻片的1/3位置上,然后輕輕抬起此端,使懸液緩慢流至玻片另一端,平放使其在空氣中自然干燥固定.切忌用火焰烘干.
3、在涂片部位滴甲液,染色3~5min.
4、用蒸餾水輕輕沖洗.
5、加乙液染30~60s,可在酒精燈上稍稍加熱.沖洗多余的染液.
6、制片干后檢查.
【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】
1、顯微鏡下檢查鞭毛染成什么顏色和形狀.
2、比較菌種鞭毛著生的位置、數(shù)目并繪圖.
【思考題】
1、菌種的培養(yǎng)時(shí)間與鞭毛染色有什么關(guān)系?
2、你在顯微鏡下看到的鞭毛是否為原來(lái)的大小和形狀?
3、鞭毛涂片與芽孢涂片有何區(qū)別?為什么?
編輯：songjiajie2010
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關(guān)鍵詞：
細(xì)菌鞭毛染色
