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實(shí)驗(yàn)動物的采血法

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-06-27

實(shí)驗(yàn)研究中,經(jīng)常要采集實(shí)驗(yàn)動物的血液進(jìn)行常規(guī)質(zhì)量檢測、細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)或進(jìn)行生物化學(xué)分析,故必須掌握正確的采集血液的技術(shù)。采血方法的選擇,主要決定于實(shí)驗(yàn)的目的和所需血量以及動物種類。
一、大鼠、小鼠的采血方法
(一)剪尾采血:需血量很少時(shí)常用本法,如作紅、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測定、制作血涂片等可與此法。動物麻醉后,將尾尖剪去約5mm,從尾部向尾尖部按摩,血即從斷端流出。也可用刀割破尾動脈或尾靜脈,讓血液自行流出。如不麻醉,采血量較小。采血結(jié)束后,消毒、止血。用此法每只鼠可采血10余次。小鼠可每次采血約0.1ml,大鼠約0.4ml。
(二)眼眶后靜脈叢采血:穿刺采用一根特制的長7~10cm硬的玻璃取血管,其一端內(nèi)徑為1 ~1.5mm,另一端逐漸擴(kuò)大,細(xì)端長約1cm即可,將取血管浸入1%肝素溶液,干燥后使用。采血時(shí),左手拇指及食指抓住鼠兩耳之間的皮膚使鼠固定,并輕輕壓迫頸部兩側(cè),阻礙靜脈回流,使眼球充分外突,提示眼眶后靜脈叢沖血。右手持取血管,將其尖端插入內(nèi)眼角與眼球之間,輕輕向眼底方向刺入,當(dāng)感到有阻力時(shí)即停止刺入,旋轉(zhuǎn)取血管以切開靜脈叢,血液即流入取血管中。采血結(jié)束后,拔出取血管,放松左手,出血即停止。用本法在短期內(nèi)可重復(fù)采血。小鼠一次可采血0.2~0.3ml,大鼠一次可采血0.5~1.0ml。
(三)頸(股)靜脈或頸(股)動脈采血:將鼠麻醉,剪去一側(cè)頸部外側(cè)被毛,作頸靜脈或頸動脈分離手術(shù),用注射器即可抽出所需血量。大鼠多采用股靜脈或股動脈,方法是:大鼠經(jīng)麻醉后,剪開腹股溝處皮膚,即可看到股靜脈,把此靜脈剪斷或用注射器采血即可,股動脈較深需剝離出,再采血。
(四)摘眼球采血:此法常用于鼠類大量采血。采血時(shí),用左手固定動物,壓迫眼球,盡量使眼球突出,右手用鑷子或止血鉗迅速摘除眼球,眼眶內(nèi)很快流出血液。
(五)斷頭采血:用剪子迅速剪掉動物頭部,立即將動物頸朝下,提起動物,血液可流入已準(zhǔn)備好的容器中。
二、豚鼠采血方法
(一)耳緣切口采血:先將豚鼠耳消毒,用刀片沿血管方向割破耳緣,切口約長0.5cm,在切口邊緣涂上20%的檸檬酸鈉溶液,防治血凝,則血可自切口處流出。此法采血每次可采0.5ml。
(二)背中足靜脈采血:固定豚鼠,將其右或左后肢膝關(guān)節(jié)伸直,腳背消毒,找出足靜脈,左手拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手將注射針刺入靜脈,拔針后立即出血。
(三)心臟采血:用手指觸摸,選擇心跳最明顯的部位,把注射針刺入心臟,血液即流入針管。心臟采血時(shí)所用的針頭應(yīng)細(xì)長些,以免發(fā)生采血后穿刺孔出血。
三、兔的采血方法
(一)耳緣靜脈采血:將兔固定,拔去耳緣靜脈局部的被毛,消毒,用手指輕彈兔耳,使靜脈擴(kuò)張,用針頭刺耳緣靜脈末端,或用刀片沿血管方向割破一小切口,血液即流出。本法為兔最常用的采血方法,可多次重復(fù)使用。
(二)耳中央動脈采血:在兔耳中央有一條較粗的、顏色較鮮紅的中央動脈。用左手固定兔耳,右手持注射器,在中央動脈的末端,沿著與動脈平行的向心方向刺入動脈,即可見血液進(jìn)入針管。由于兔耳中央動脈容易痙攣,故抽血前必須讓兔耳充分充血,采血時(shí)動作要迅速。采血所用針頭不要太細(xì),一般用6號針頭,針刺部位從中央動脈末端開始,不要在近耳根部采血。
(三)頸靜脈采血:方法同小鼠、大鼠的頸靜脈采血。
(四)心臟采血:使家兔仰臥,穿刺部位在第三肋間胸骨左緣3mm處, 針頭刺入心臟后,持針手可感覺到兔心臟有節(jié)律的跳動。此時(shí)如還抽不到血,可以前后進(jìn)退調(diào)節(jié)針頭的位置,注意切不可使針頭在胸腔內(nèi)左右擺動,以防弄傷兔的心、肺。
四、狗的采血方法
(一)后肢外側(cè)小隱靜脈采血:后肢外側(cè)小隱靜脈位于后肢脛部下三分之一的外側(cè)淺表皮下,由前側(cè)方向后行走。采血時(shí),將動物固定,局部剪毛、消毒,采血者左手緊握剪毛區(qū)上部或扎緊止血帶,使下部靜脈充血,右手用連有6號或7號針頭的注射器刺入靜脈,左手放松,已適當(dāng)速度抽血即可。
(二)前肢背側(cè)皮下頭靜脈采血:前肢背側(cè)皮下頭靜脈位于前腳爪的上方背側(cè)的正前位。采血方法同上。
(三)頸靜脈采血:前兩種方法需技術(shù)熟練,且不適于連續(xù)采血。大量或連續(xù)采血時(shí),可采用頸靜脈采血,方法同小鼠、大鼠的頸靜脈采血方法。
(四)股動脈采血:本法為采取動脈血最常用的方法。操作簡便,稍加訓(xùn)練的狗,在清醒狀態(tài)下將狗臥位固定于狗解剖臺上。伸展后肢向外伸直,暴露腹股溝三角動脈搏動的部位,剪毛、消毒,左手中指、食指探模股動脈跳動部位,并固定好血管,右手取連有5號半針頭的注射器,針頭由動脈跳動處直接刺入血管,若刺入動脈一般可見鮮紅血液流入注射器,有時(shí)還需微微轉(zhuǎn)動一下針頭或上下移動一下針頭,方見鮮紅血液流入。有時(shí)可能刺入靜脈,必須重抽。抽血畢,迅速拔出針頭,用干藥棉壓迫止血2-3分鐘。

 
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