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PCR技術(shù)簡介

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-06-28

一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統(tǒng)Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習(xí)生有不正當?shù)年P(guān)系。因為他知道現(xiàn)在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據(jù)。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現(xiàn)代技術(shù)正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶鏈式反應(yīng)具有的特色之一。這也是分子生物醫(yī)學(xué)令人震撼的一例。


何謂PCR
簡單的說,PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內(nèi) (In Vitro) 的大量合成。基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復(fù)制.目前常用的技術(shù),可以將一段基因復(fù)制為原來的一百億至一千億倍。


PCR的要素
基本的PCR須具備1.要被復(fù)制的DNA模板 (Template) 2.界定復(fù)制范圍兩端的引物(Primers). 3.DNA聚合酶 (Taq. Polymearse) 4.合成的原料及水。PCR的反應(yīng)包括三個主要步驟,分別是1). Denaturation 2). Annealing of primers, and 3). Extension of primers。 所謂 Denaturing乃是將DNA加熱變性, 將雙股的DNA加熱后轉(zhuǎn)為單股DNA以做為復(fù)制的模板. 而Annealing 則是令 Primers于一定的溫度下附著于模板DNA兩端。 最后在DNA聚合酶 (e.g. Taq-polymerase) 的作用下進行引物的延長 (Extension of primers)及另一股的合成。

 
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