AMAMFSAc05024  奶油  巧克力  果糖  葡萄糖  乳糖  麥牙糖  蔗糖  液相色譜法

AM-AM-FS-Ac-05024

奶油巧克力中果糖、葡萄糖、乳糖、麥牙糖和蔗糖

1.儀器和試劑
1.1 儀器
(a)液相色譜儀——帶有M600OA型泵，R401型折射率檢測儀或相當(dāng)?shù)膬x器，及10mV記錄儀。
(b)柱填充物碳水化合物柱，300×4mm(內(nèi)徑)。
柱子必須符合以下標(biāo)準(zhǔn):
對果糖的容量因子=K′=（tR－to）/to≥5其中tR=果糖的保留時(shí)間=從進(jìn)樣到出現(xiàn)最大峰高的時(shí)間;to=溶劑的保留時(shí)間=從溶劑進(jìn)樣到出現(xiàn)第一個(gè)基線變形的最大峰高或溶劑峰。
分辨因子(兩個(gè)譜帶中心之間的距離除以平均譜帶寬度=Rs=（t2－t1）/0.5（tw1+tw2），其中t1和t2分別為從進(jìn)樣到第二峰(萄萄糖)出現(xiàn)最大峰高和第一峰(果糖)出現(xiàn)最大峰高的時(shí)間;tw！和tw2分別為第一和第二峰的基線寬度(以時(shí)間單位計(jì))。對果糖:葡萄糖的比率為2.0—0.5，Rs≥1.0;對于比率≥2的，Rs≥1.25。
當(dāng)任一個(gè)或兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)不符時(shí)，則換柱子。
(c)進(jìn)樣閥——7120LC型帶有50μl環(huán)的進(jìn)樣器，或同類產(chǎn)品。
(d)輔助設(shè)備——Bransonic12型超聲浴或同類儀器，用以溶劑脫氣；攪拌器；溶劑純化過濾裝置。
1.2 試劑
(a)糖的標(biāo)準(zhǔn)溶液——濃度為10μg/ml。真空條件下在60℃分別干燥糖的標(biāo)準(zhǔn)物(果糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖、麥牙糖)12h。將其溶于水中并逐次稀釋到濃度為10μg/ml。當(dāng)日制備。
(b)流動相——CH3CN十H2O(經(jīng)活性炭過濾)(80+20)。通過WhatmanGF/F0.7μm玻璃纖維漏斗過濾，使用前在超聲浴上脫氣。
2.試驗(yàn)過程
2.1.樣品的制備
稱量10.0g細(xì)碎的奶油巧克力，放入≥100ml的離心瓶中，并加入50ml石油醚。在大約每分鐘1800轉(zhuǎn)下離心約15min。傾潷去上層清液，再萃取。
用玻璃棒研碎殘留物，加入100g H2O，并稱重。放在85-90℃水浴上加熱25min。冷卻至室溫，加水至原重量。在每分鐘2000轉(zhuǎn)下離心10min，吸取上層清液，并用0.45μm Swinney注射過濾器過濾。
2.2.測定
    用50μL進(jìn)樣環(huán)吸滿樣品溶液，注入帶有流動溶劑的柱子，流動溶劑流速為1.5—2.0ml/min。將每種糖的樣品的峰高或峰面積與相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)峰高或峰面積相比較來計(jì)算每種糖的濃度。全部都使用同種方法測定 (面積或高度)。
3.來源
AOAC 官方方法980.13第17版

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