最近網(wǎng)上一條「如何定量吸取液體?」的帖子引起熱烈討論。原因是博主 po 出 100 年前的移液方式——用嘴巴吸,在眾多手動自動、單孔連排移液槍圖片的中間,顯得尤為突出和滑稽。
不過更讓人震驚的是評論區(qū)的精彩發(fā)言,直到現(xiàn)在仍然有老師同學(xué)在用這個「傳統(tǒng)」的操作。
其實「嘴巴移液」已延續(xù)百年,因為這樣操作可以在一定程度上做到「又準(zhǔn)又穩(wěn)」。但用嘴巴移液這樣的操作,肯定是存在風(fēng)險的,比如:1893 年一位內(nèi)科醫(yī)生在操作時因為意外而吸入了傷寒桿菌的培養(yǎng)液,不幸中招。
現(xiàn)在,大多數(shù)實驗室都配備了移液槍,更加安全更加精準(zhǔn)。但別以為這樣就結(jié)束了,因為移液不準(zhǔn),會引發(fā)太大的災(zāi)難——實驗數(shù)據(jù)重現(xiàn)「危機(jī)」,實驗數(shù)據(jù)無法復(fù)制,代表了前期努力全部白費!比如:PCR 實驗做了三次,每次結(jié)果都不一樣;WB,樣本參數(shù)都相同,每次趨勢卻各不同;實驗數(shù)據(jù)重現(xiàn)不出來,輸在起跑線上……
因此,各大移液器品牌均建議每年至少進(jìn)行一次預(yù)防性維護(hù)且在保養(yǎng)間隔期間進(jìn)行常規(guī)性能驗證,以保持吸液和分液的準(zhǔn)確度。那么,日常實驗中如何開展檢查、清潔消毒、正確移液等才能提升實驗數(shù)據(jù)穩(wěn)定性,讓實驗一遍過呢?
秘籍內(nèi)容一睹為快:
1. 選擇優(yōu)質(zhì)移液槍
若要實現(xiàn)可重現(xiàn)移液,請選擇在整個移液循環(huán)(吸液和分液)中都準(zhǔn)確無誤的優(yōu)質(zhì)移液槍。
2. 選擇正確吸頭
移液槍吸頭是樣品和移液槍之間的唯一接觸點,因此所選的移液槍吸頭類型在液體處理過程中發(fā)揮著重要作用。
● 未滅菌吸頭適用于無需擔(dān)心污染或不會影響結(jié)果的實驗。
● 無菌吸頭適用于細(xì)胞培養(yǎng)和分子檢測等敏感實驗,可防止污染物影響結(jié)果,進(jìn)而影響實驗的可重現(xiàn)性。
● 無菌濾芯吸頭可減少氣霧形成、保護(hù)移液槍套柄在使用過程中免受污染,從而多加一層保護(hù)。
3. 改進(jìn)移液技術(shù)
選擇正確維護(hù)且經(jīng)驗證的優(yōu)質(zhì)移液槍,同時搭配原廠吸頭,還可通過改善操作人員技術(shù)來提高數(shù)據(jù)重現(xiàn)性。
以移液槍標(biāo)稱值上限進(jìn)行操作
大多數(shù)移液槍的正常量程為標(biāo)稱容量的 10% 至 100%。
適當(dāng)?shù)奈^入液
微量移液槍的吸頭入液深度應(yīng)當(dāng)為 1~2 mm,大容量移液槍(200~2 000 μL) 的吸頭入液深度高達(dá) 6~10 mm。
提高吸液性能
在使用過程中保持移液槍角度垂直、移液節(jié)奏一致、活塞操作迅速流暢。
提高分液性能
較為常用的一種分液技術(shù)是將吸頭接觸容器內(nèi)壁的側(cè)面。如果溶液溫度為室溫,則潤洗吸頭兩到三次可在吸頭內(nèi)壁形成一層液膜。如果溶液溫度低于4℃ 和高于 37℃,則應(yīng)避免潤洗吸頭。
創(chuàng)造適合的環(huán)境條件
移液環(huán)境溫度應(yīng)保持穩(wěn)定。移液的理想溫度為 21.5℃±1℃,與校準(zhǔn)的理想溫度相同。
文章(文字)來源:丁香學(xué)術(shù)
不過更讓人震驚的是評論區(qū)的精彩發(fā)言,直到現(xiàn)在仍然有老師同學(xué)在用這個「傳統(tǒng)」的操作。
其實「嘴巴移液」已延續(xù)百年,因為這樣操作可以在一定程度上做到「又準(zhǔn)又穩(wěn)」。但用嘴巴移液這樣的操作,肯定是存在風(fēng)險的,比如:1893 年一位內(nèi)科醫(yī)生在操作時因為意外而吸入了傷寒桿菌的培養(yǎng)液,不幸中招。
現(xiàn)在,大多數(shù)實驗室都配備了移液槍,更加安全更加精準(zhǔn)。但別以為這樣就結(jié)束了,因為移液不準(zhǔn),會引發(fā)太大的災(zāi)難——實驗數(shù)據(jù)重現(xiàn)「危機(jī)」,實驗數(shù)據(jù)無法復(fù)制,代表了前期努力全部白費!比如:PCR 實驗做了三次,每次結(jié)果都不一樣;WB,樣本參數(shù)都相同,每次趨勢卻各不同;實驗數(shù)據(jù)重現(xiàn)不出來,輸在起跑線上……
因此,各大移液器品牌均建議每年至少進(jìn)行一次預(yù)防性維護(hù)且在保養(yǎng)間隔期間進(jìn)行常規(guī)性能驗證,以保持吸液和分液的準(zhǔn)確度。那么,日常實驗中如何開展檢查、清潔消毒、正確移液等才能提升實驗數(shù)據(jù)穩(wěn)定性,讓實驗一遍過呢?
秘籍內(nèi)容一睹為快:
1. 選擇優(yōu)質(zhì)移液槍
若要實現(xiàn)可重現(xiàn)移液,請選擇在整個移液循環(huán)(吸液和分液)中都準(zhǔn)確無誤的優(yōu)質(zhì)移液槍。
2. 選擇正確吸頭
移液槍吸頭是樣品和移液槍之間的唯一接觸點,因此所選的移液槍吸頭類型在液體處理過程中發(fā)揮著重要作用。
● 未滅菌吸頭適用于無需擔(dān)心污染或不會影響結(jié)果的實驗。
● 無菌吸頭適用于細(xì)胞培養(yǎng)和分子檢測等敏感實驗,可防止污染物影響結(jié)果,進(jìn)而影響實驗的可重現(xiàn)性。
● 無菌濾芯吸頭可減少氣霧形成、保護(hù)移液槍套柄在使用過程中免受污染,從而多加一層保護(hù)。
3. 改進(jìn)移液技術(shù)
選擇正確維護(hù)且經(jīng)驗證的優(yōu)質(zhì)移液槍,同時搭配原廠吸頭,還可通過改善操作人員技術(shù)來提高數(shù)據(jù)重現(xiàn)性。
以移液槍標(biāo)稱值上限進(jìn)行操作
大多數(shù)移液槍的正常量程為標(biāo)稱容量的 10% 至 100%。
適當(dāng)?shù)奈^入液
微量移液槍的吸頭入液深度應(yīng)當(dāng)為 1~2 mm,大容量移液槍(200~2 000 μL) 的吸頭入液深度高達(dá) 6~10 mm。
提高吸液性能
在使用過程中保持移液槍角度垂直、移液節(jié)奏一致、活塞操作迅速流暢。
提高分液性能
較為常用的一種分液技術(shù)是將吸頭接觸容器內(nèi)壁的側(cè)面。如果溶液溫度為室溫,則潤洗吸頭兩到三次可在吸頭內(nèi)壁形成一層液膜。如果溶液溫度低于4℃ 和高于 37℃,則應(yīng)避免潤洗吸頭。
創(chuàng)造適合的環(huán)境條件
移液環(huán)境溫度應(yīng)保持穩(wěn)定。移液的理想溫度為 21.5℃±1℃,與校準(zhǔn)的理想溫度相同。
文章(文字)來源:丁香學(xué)術(shù)