測試片法介紹
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方法原理及操作
測試片主要由培養(yǎng)基、冷水可凝膠、顯色劑組成,菌落總數(shù)大多數(shù)用的顯色劑是TTC。細菌在測試片上生長時,細胞代謝產(chǎn)物與濃度極低的指示劑TTC發(fā)生氧化還原反應,將指示劑還原成紅色產(chǎn)物,從而使細菌著色。所以,大多數(shù)測試片上紅色菌落判斷為菌落總數(shù)。
操作流程:在無菌條件下,吸取1mL待檢樣品滴加到測試紙片中, 覆蓋好紙片放置 36 °C±1 °C培養(yǎng) 48 h±2h(有快速測試片為24h±2h)。
計數(shù)全部紅色菌落為菌落總數(shù)(但也有雙顯色劑的測試片)。
02
適用范圍
由于操作簡單,被廣泛使用于加工過程菌落總數(shù)快速測定。適用于大部分食品及環(huán)境涂抹樣本,試用范圍較廣泛。
顏色較深樣品可能會有干擾,部分辛辣調(diào)味料會有干擾抑制,可選用特殊的樣品處理方式,如選擇合適的稀釋倍數(shù)或帶濾網(wǎng)的均質(zhì)袋進行樣品處理,具體依據(jù)各廠家的技術聲明來執(zhí)行。
03
主要方法特點
操作簡單,節(jié)省人工。減少了培養(yǎng)基準備工作, 節(jié)省了大量的人力物力。
平板菌落結(jié)果一致性好,避免了熱損傷菌落蔓延發(fā)生減少。
判讀更清晰,易與食品顆粒分開。
節(jié)省培養(yǎng)空間。檢測同樣數(shù)量的樣品,使用測試片所占的空間比平板要少很多,大大節(jié)省培養(yǎng)空間。
安全性高,不易碎、不會對人員造成潛在的傷害,另密封比較好,不容易直接接觸菌落。
04
常見問題
(1)出現(xiàn)菌落蔓延、水化現(xiàn)象
主要由食品中的芽孢桿菌引起的易產(chǎn)生液化的產(chǎn)品:冰淇淋、糕點、加工肉制品、調(diào)味料等。可以減少堆疊數(shù)量或者進一步稀釋來緩解。
(2)TTC具有一定抑菌功能,測試片以TTC為指示劑是否有影響?
首先,測試片生產(chǎn)時添加的是極低濃度的TTC,低濃度的TTC對多數(shù)常見微生物是不造成抑制的;其次,多數(shù)測試片的工藝采取的是分層涂布,TTC位于最上層,菌體長出來后才能接觸到低濃度TTC。
(3)有些樣品,低稀釋度菌不生長,高稀釋度菌生長,如含有防腐劑、抑菌劑等具有一定抑制作用的樣本;含有乳酸菌較多的樣本;pH值較低的樣本。
可以通過稀釋梯度來解決。
(4)開封后測試片的保存方法及原因?
密封夾密封后,常溫/冷藏、避光、干燥保存,并于1個月內(nèi)使用完。如果從冰箱中取出后要常溫放置一段時間再打開使用以防止冷凝水的產(chǎn)生。
(5)測試片是否容易導致污染?
首先,測試片是預制的無菌培養(yǎng)基系統(tǒng);其次,測試片的接種操作時間短,只要遵循無菌操作,其污染的幾率相對傳統(tǒng)方法更。磺遗囵B(yǎng)過程中,測試片的接種生長區(qū)域處于密封狀態(tài),不會導致污染。