衍生化的副產(chǎn)物可進行預(yù)處理以降低或消除其干擾；形成的副產(chǎn)物可能對色譜分離造成較大困難；在衍生化過程中，容易引入雜質(zhì)或干擾峰，或使樣品損失。
形成副產(chǎn)物不重要，產(chǎn)物也不需要高的穩(wěn)定性，只需要有好的重復(fù)性即可；被分析物可以在其原有的形式下進行分離，容易選用已有的分析方法。反應(yīng)器可造成峰展寬，降低分辨率；有過量的試劑會造成干擾。由于柱后衍生化法受儀器的制約，多數(shù)還是采用柱前衍生化法。下面詳細介紹一下柱前衍生化法。柱前衍生化就是在色譜分離之前將樣品與一定的化學(xué)試劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，將樣品中的目標化合物制備成適當?shù)难苌�，然后再用色譜進行分離檢測。①將一些不適合某種色譜技術(shù)分析的化合物轉(zhuǎn)化成可以用該種色譜技術(shù)分析的衍生物。如某些無法氣化或熱不穩(wěn)定的化合物不能用氣相色譜分析，通過衍生化轉(zhuǎn)化成可以汽化的或熱穩(wěn)定的衍生物，然后再用氣相色譜分析。②提高檢測的靈敏度，如很多化合物û有紫外吸收或紫外吸收很弱，而其它檢測方法靈敏度又不夠，這就可以通過衍生化反應(yīng)給這些化合物接上一個有強紫外吸收的基團，以此來提高這些化合物的檢測靈敏度。又如氣相色譜的電子捕獲檢測器對含±素的化合物有很高的靈敏度，可以通過衍生化反應(yīng)將一些化合物接上±素基團，提高這些化合物的檢出靈敏度。③改善分離度。如一些異構(gòu)體在色譜上很難分離，通過衍生化反應(yīng)，使兩個異構(gòu)體生成的衍生物色譜性能產(chǎn)生較大差異而得到分離。對一些難分離的物質(zhì)對也可以選用某些衍生化試劑，只使其中一個發(fā)生衍生化反應(yīng)轉(zhuǎn)化成衍生物，兩者可得到分離。④利用衍生化反應(yīng)可以幫助化合物結(jié)構(gòu)的鑒定，這點在使用色譜-質(zhì)譜，色譜-紅外光譜和色譜-核磁共振波譜聯(lián)用方法確定化合物結(jié)構(gòu)時作用更加明顯。不同模式的色譜柱前衍生化的目的有不同的側(cè)重，氣相色譜中柱前衍生化主要是改善目標化合物的揮發(fā)性；而液相色譜和薄層色譜中柱前衍生化的主要目的是改善檢測能力。所以不同模式的色譜柱前衍生化的方法和所用的衍生化試劑也略有不同。色譜中柱前衍生化使用的衍生化反應(yīng)應(yīng)滿足以下幾個條件：① 衍生化反應(yīng)要既迅速又完全，便于計算衍生物的含量及定量計算。② 反應(yīng)的選擇性高，最好只與目標化合物反應(yīng)，即反應(yīng)要有專一性。③ 衍生化反應(yīng)產(chǎn)物只有一種，反應(yīng)的副產(chǎn)物和過量的衍生化試劑應(yīng)不干擾目標化合物的分離與檢測。總之，柱前衍生化可以擴大色譜分析的應(yīng)用范Χ，使色譜分析的結(jié)果能更令人滿意，所以柱前衍生化是色譜樣品處理的一個重要方法。
發(fā)布日期：2022-07-07
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