要培養(yǎng)微生物,首先就需要接種,而接種必須在無菌條件下進(jìn)行。這就需要建造無菌室或接種箱,為接種創(chuàng)造必要的條件。
無菌室可以建在實(shí)驗(yàn)室內(nèi),作為實(shí)驗(yàn)室的一個(gè)小套間。面積為4~5平方米,高2.5米左右。無菌室外應(yīng)連接一個(gè)小緩沖間,面積為2平方米左右。緩沖間和無菌室的門不要建在同一條直線上,以減少空氣中雜菌進(jìn)入無菌室。
無菌室和緩沖間應(yīng)作到清潔、密閉性好,室內(nèi)最好有換氣設(shè)備,以便在工作結(jié)束后更換室內(nèi)空氣。兩個(gè)房間中應(yīng)各安裝l盞30瓦紫外線燈管和照明用的日光燈,無菌室的紫外線燈應(yīng)懸吊在工作臺(tái)的正上方,距臺(tái)面1米,以發(fā)揮最大的消毒功能。無菌室內(nèi)的工作臺(tái)等用具用品,應(yīng)經(jīng)常保持清潔,避免雜菌污染。
如果沒有條件建造無菌室,可以用木制的接種箱代替。接種箱結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,容易制作,其正面安裝玻璃,便于觀察。箱前方開兩個(gè)圓洞各接連1只套袖,操作時(shí)將兩臂從套袖伸入箱內(nèi)進(jìn)行操作。箱內(nèi)也應(yīng)懸吊一盞紫外線殺菌燈和一盞日光燈。接種箱的尺寸規(guī)格見圖9-1。
恒溫箱
用于恒溫條件下培養(yǎng)微生物。恒溫箱的調(diào)溫范圍一般為20~45℃之間。培養(yǎng)酵母菌和霉菌時(shí),一般可調(diào)至28℃,培養(yǎng)細(xì)菌和放線菌時(shí),可根據(jù)菌種的生長(zhǎng)溫度進(jìn)行調(diào)溫,一般為30~37℃。
電烘箱(干燥箱)
用于玻璃器皿等物的烤干和滅菌。電烘箱的調(diào)溫的范圍一般為40~180℃,對(duì)玻璃器皿等物進(jìn)行滅菌時(shí),可將溫度調(diào)至160℃,滅菌4小時(shí),即可將器皿上的微生物全部殺死。滅菌完畢后,在電烘箱溫度還沒有降到50~70℃以前,不要打開電烘箱,以免器皿破裂。
冰箱
用于保藏菌種和需要低溫保存的藥品。
高壓蒸汽滅菌鍋
是微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中最重要的滅菌工具,用于一般培養(yǎng)基和玻璃器皿等物的滅菌。在15磅/英寸2壓力下(121.6℃),滅菌15~30分鐘,可以殺死包括芽孢在內(nèi)的全部微生物。
離心機(jī)
用它使菌體和液體培養(yǎng)基分開。一般多使用普通小型“蘑菇”式離心機(jī),最高轉(zhuǎn)數(shù)為4000轉(zhuǎn)/分,用電力啟動(dòng)。如果沒有條件置備電動(dòng)離心機(jī),可用手搖離心器代替。
接種針
用于接種和分離微生物。根據(jù)不同用途做成針狀、環(huán)狀、鉤狀、刀狀和鏟狀等。接種針由針頭和針柄兩部分組成。針頭由白金或鉻鎳合金(細(xì)電爐絲)制成,長(zhǎng)約7厘米。針柄可用玻璃棒或鋁管制成,長(zhǎng)約20厘米。將針頭燒結(jié)在針柄上即成。
天平
用于稱量各種試劑。托盤天平或扭力天平均可,感量應(yīng)為0.01克。
酒精燈
用于接種時(shí)對(duì)接種工具進(jìn)行滅菌。酒精燈火焰上部熱度最高,應(yīng)利用這一最高溫度區(qū)燒灼接種針或試管口。
顯微鏡
用于觀察微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu),顯微鏡應(yīng)配備油鏡頭,以便能看清細(xì)菌的形態(tài)。
常用玻璃器皿
(1)培養(yǎng)皿(平皿):用于盛放固體培養(yǎng)基,是培養(yǎng)微生物和觀察微生物的主要器皿。一般直徑為9厘米。可根據(jù)活動(dòng)規(guī)模準(zhǔn)備若干個(gè)。
(2)試管:用于盛放斜面培養(yǎng)基(固體),是接種微生物的主要器皿。常用的有兩種。較大的長(zhǎng)220毫米,直徑20毫米;較小的長(zhǎng)150毫米,直徑15毫米?筛鶕(jù)需要選用其中一種,并準(zhǔn)備若干個(gè)。
(3)錐形瓶:用于盛放液體培養(yǎng)基。是用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物的主要器皿。一般容量為50、100、250、300、500、1000毫升。可根據(jù)活動(dòng)需要選擇和準(zhǔn)備。
(4)量筒、量杯:用于定量量取各種液體。
(5)移液管(吸管):一般容量為0.5、1、5、10毫升等,可根據(jù)需要選擇和準(zhǔn)備。
(6)其它:燒杯、漏斗等。