1、報告基因檢測
報告基因的檢測是評價啟動子調(diào)控效率和其中作用元件的有效方法.經(jīng)常使用的還有雙報告系統(tǒng): 同時向細(xì)胞中轉(zhuǎn)入兩種報告基因, 其中一種為待研究的啟動子控制(熒火蟲熒光素酶),另一種為不被處理所影響的啟動子控制(海腎熒光素酶)作為內(nèi)參,可消除系統(tǒng)誤差.
報告基因檢測的優(yōu)勢:
• 減小隨機(jī)誤差
• 比率計算避免了系統(tǒng)誤差
• 超高的靈敏度 ( 極低的背景干擾)
• 動力學(xué)范圍更廣
• 發(fā)光強(qiáng)度在4~6個數(shù)量級之間與測定物質(zhì)濃度間呈線性關(guān)系
• 無需昂貴的設(shè)備投入
• 手段更為靈活
2、化學(xué)發(fā)光免疫分析
3、核酸定量 (PCR Quantification)
4、酶活分析
5、活性氧分析
6、BRET分析
主要用來研究分子間相互作用,如:
• 蛋白組學(xué)
–監(jiān)測蛋白-蛋白相互作用
–檢測胞內(nèi)細(xì)胞器間的相互作用
–在哺乳動物細(xì)胞中對酵母雙雜交結(jié)果的驗(yàn)證
• 受體研究
• 細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路研究