購(gòu)買(mǎi)前
【方法一】向廠(chǎng)家索要或從其網(wǎng)站下載說(shuō)明書(shū),查找ELISA的性能指標(biāo):準(zhǔn)確度(加標(biāo)回收率、稀釋線(xiàn)性)、精密度(板內(nèi)差、板間差)、靈敏度、樣本值、特異性、校準(zhǔn)。一般來(lái)說(shuō),除了校準(zhǔn)不一定每份說(shuō)明書(shū)都有外,其余的指標(biāo)一般都需要羅列(部分樣本需要高倍稀釋的,可能沒(méi)有準(zhǔn)確度這個(gè)指標(biāo))。如果無(wú)法提供這些性能指標(biāo),則說(shuō)明該試劑盒可能是假貨,或者試劑盒開(kāi)發(fā)過(guò)程不夠科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn),有可能無(wú)法檢測(cè)出真實(shí)的樣本值。
【方法二】對(duì)于夸大ELISA涵蓋的指標(biāo)的范圍,尤其是不常見(jiàn)的種屬,可先去國(guó)際ELISA試劑盒供應(yīng)商(如eBioscience、R&D)網(wǎng)站上搜索,如果搜索不到該種屬的ELISA試劑盒,則有可能是假貨,需要小心謹(jǐn)慎。
【方法三】將“廠(chǎng)家名”、“ELISA”和“假貨”等關(guān)鍵詞在網(wǎng)上搜索,有的網(wǎng)站等會(huì)有打假曝光臺(tái)。
購(gòu)買(mǎi)后
【方法一】檢查說(shuō)明書(shū)、包裝盒的質(zhì)量,通常偽劣產(chǎn)品為了降低成本,印刷的質(zhì)量會(huì)比較差。其次仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū),如上所示查找ELISA的性能指標(biāo)。
【方法二】
、.利用干擾實(shí)驗(yàn)即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測(cè)目的抗原,方法如下:
(1)將針對(duì)試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測(cè)抗體配置成antibody:antigen=1:2的混合孵育液
(2)37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測(cè)抗體
(3)后續(xù)操作按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,加檢測(cè)抗體、酶復(fù)合物和底物
(4)實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測(cè)其標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),如果標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)良好則說(shuō)明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測(cè)抗體針對(duì)的是非目的抗原,該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(5)如果標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)無(wú)線(xiàn)性,則說(shuō)明試劑盒檢測(cè)抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實(shí)際試劑盒抗體的檢測(cè)作用,則該試劑盒檢測(cè)抗體針對(duì)的是目的抗原。
、.如果購(gòu)買(mǎi)了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,利用交叉實(shí)驗(yàn)即可鑒別ELISA試劑盒是否造假,方法如下:
(1)取出購(gòu)買(mǎi)的試劑盒A的包被板兩條。
(2)一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
(3)另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
(4)后續(xù)操作按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,加檢測(cè)抗體、酶復(fù)合物和底物。
(5)實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測(cè)兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)一致則說(shuō)明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)的同一個(gè)指標(biāo)而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(6)如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)不一致則說(shuō)明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)的不同指標(biāo),試劑盒A只能檢測(cè)A,不能檢測(cè)B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。