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關(guān)于改進(jìn)和大力推行“乙酰膽堿酯酶抑制率測定蔬菜水果農(nóng)殘”的建議

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2014-08-19
核心提示:摘 要 本建議在原有基礎(chǔ)上作了技術(shù)上進(jìn)行改進(jìn),使抑制率的檢測農(nóng)殘數(shù)據(jù)更為科學(xué)、嚴(yán)謹(jǐn)可信,使之可作為執(zhí)法依據(jù)提供技術(shù)支撐,
 摘 要 本建議在原有基礎(chǔ)上作了技術(shù)上進(jìn)行改進(jìn),使抑制率的檢測農(nóng)殘數(shù)據(jù)更為科學(xué)、嚴(yán)謹(jǐn)可信,使之可作為執(zhí)法依據(jù)提供技術(shù)支撐,從而高效快速地實(shí)現(xiàn)農(nóng)殘檢測,食品安全保障中有力的補(bǔ)充,對(duì)大幅節(jié)省檢測費(fèi)用支出,保證食品安全有重大意義。

關(guān)鍵詞 乙酰膽堿酯酶(AchE ) 抑制率(inhibition ratio) 快速檢測(quick detection)

隨著人們的生活質(zhì)量的不斷提高,健康意識(shí)不斷加強(qiáng),中國農(nóng)產(chǎn)品出口面臨重大機(jī)遇與挑戰(zhàn)的關(guān)鍵時(shí)期,國家認(rèn)監(jiān)委計(jì)劃舉辦“第十二屆全國HACCP應(yīng)用與認(rèn)證研討會(huì)”,可謂廣開言路,對(duì)有效控制食品安全事故發(fā)生,推進(jìn)農(nóng)產(chǎn)品出口,提升HACCP體系理論水平都具有重大意義。在此,筆者談?wù)勱P(guān)于食品加工、流通環(huán)節(jié)中的關(guān)鍵控制點(diǎn):在原料驗(yàn)收環(huán)節(jié),以及蔬菜、水果市場準(zhǔn)入和出入境農(nóng)殘檢測中,提出加大“乙酰膽堿酯酶抑制率測定蔬菜水果農(nóng)殘”(以下簡稱“抑制率法”)應(yīng)用力度的建議,以高效、快捷、低成本保證食品安全、避免引起農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量的國際糾紛來增加一道保險(xiǎn);且建議將“抑制率”作為判定是否合格的重要參考數(shù)據(jù)作為供有關(guān)管理部門的執(zhí)法依據(jù)。
抑制率法最早源于西方醫(yī)學(xué)、農(nóng)產(chǎn)品等領(lǐng)域,國內(nèi)外的相關(guān)文獻(xiàn)不少。有的國家或地區(qū),如東南亞及中國臺(tái)灣已將抑制率的檢測結(jié)果作為判定農(nóng)產(chǎn)品是否允許進(jìn)入市場流通的重要依據(jù)之一。2001年以來,中國出臺(tái)了《蔬菜上有機(jī)磷和安基甲酸酯類農(nóng)藥殘毒快速檢測法》標(biāo)準(zhǔn):NY/T448-2001和GB/T5009-2003。但若干年來,檢驗(yàn)檢疫系統(tǒng)、農(nóng)業(yè)部門在對(duì)快速檢測器具和檢測人員的培訓(xùn)較為重視,在各地建立了大量的快速農(nóng)殘站。筆者感覺這么好的方法,在應(yīng)用上還缺乏一定的力度,如有些管理部門還未將抑制率作為執(zhí)法依據(jù)。原因是上述兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)在抑制率檢測的測試方法上本身有一定的缺陷,導(dǎo)致重現(xiàn)性較差,使采信上存在一定的難度。筆者通過實(shí)踐,做了技術(shù)上的改進(jìn),解決了這方面的問題,使之科學(xué)性更強(qiáng)。
眾所周知,合格的農(nóng)藥在農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)中是不可缺的,若不施用農(nóng)藥,農(nóng)作物在成熟前或萌芽狀態(tài)基本就被病蟲害消滅了,導(dǎo)致農(nóng)作物的減產(chǎn)或絕收。聰明的學(xué)者研究了可降解的安全農(nóng)藥,在一定的時(shí)間內(nèi)有毒性,確保農(nóng)作物不受蟲害、霉菌和雜草的干擾,正常健康地生長,只要嚴(yán)格控制休藥期,農(nóng)產(chǎn)品就安全無毒。每年數(shù)十萬噸、價(jià)格以億計(jì)的農(nóng)藥用于田間地頭,農(nóng)藥銷售、種植基地都有專業(yè)的植物醫(yī)生們做技術(shù)指導(dǎo),但在利益驅(qū)動(dòng)下,不懂科學(xué)亂用藥的、或購到假農(nóng)藥的、追求華麗的外觀不嚴(yán)格遵守休藥期的現(xiàn)象難以避免,因此產(chǎn)生了農(nóng)殘檢測的行業(yè)。
現(xiàn)今農(nóng)殘檢測的設(shè)備主要是氣相色譜或氣質(zhì)聯(lián)用儀等,這類設(shè)備能對(duì)農(nóng)殘進(jìn)行定性定量的準(zhǔn)確測定,很多國家和地區(qū)的法規(guī)對(duì)各種農(nóng)藥限量制定了標(biāo)準(zhǔn),但檢測設(shè)備價(jià)格基本都在數(shù)十萬元以上,耗材費(fèi)用高等諸多因素,導(dǎo)致檢測費(fèi)高。目前通常按檢測農(nóng)藥種類收費(fèi),每種農(nóng)藥檢測費(fèi)通常在150元到400余元。農(nóng)藥的施用隨時(shí)間、地區(qū)及病害不同,所用農(nóng)藥種類繁多,這就要求對(duì)農(nóng)產(chǎn)品樣品進(jìn)行多種農(nóng)藥項(xiàng)目的檢測,一個(gè)樣品僅農(nóng)殘項(xiàng)目的檢測費(fèi)就高達(dá)一兩千元甚至更多,檢測費(fèi)用多數(shù)情況下遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于蔬菜水果本身的利潤,且從樣品送達(dá)到出具檢測報(bào)告耗時(shí)長達(dá)數(shù)天,更長的達(dá)數(shù)月。一邊是勞動(dòng)密集型的生產(chǎn)者種植出價(jià)值在一、兩元一斤的農(nóng)產(chǎn)品,鮮蔬菜水果保質(zhì)期短,冷藏可稍微延長;另一邊是昂貴的進(jìn)口的檢測設(shè)備、檢測費(fèi),還有一些專門從事農(nóng)殘檢測的技術(shù)人員和漫長的檢測周期,還不等檢測結(jié)果出來,蔬菜水果早就變成肥料!特別是食品加工企業(yè)的原料檢測,若等檢測結(jié)果出來,早已經(jīng)變質(zhì),不能用于食品加工了,失去了檢測意義!這,顯然是一個(gè)不等式。
消費(fèi)者對(duì)所購的蔬菜水果是否安全無法判斷,無力對(duì)手中一把兩三元的菜支付數(shù)千元的檢測費(fèi)。盡管目前檢測設(shè)備購置及檢測費(fèi)用主要是國家投入進(jìn)行管理,但對(duì)每天數(shù)以億計(jì)批次的蔬菜水果,色譜法的檢測力不從心,從互聯(lián)網(wǎng)中查到的數(shù)據(jù)表明,可謂杯水車薪,一些擁有數(shù)千萬元設(shè)施的機(jī)構(gòu)每年所檢測的樣品數(shù)屈指可數(shù),年檢測萬個(gè)樣品的實(shí)驗(yàn)室寥寥無幾,能檢測的農(nóng)藥種類相當(dāng)局限,且檢測出率并不高。一次,筆者用酶抑制法對(duì)某地即將上市的水果蔬菜進(jìn)行檢測,發(fā)現(xiàn)不合格率相當(dāng)高,囑咐延長采收期,以確保產(chǎn)品質(zhì)量與安全。
如何來解上面這個(gè)不等式呢?“快速檢測法”的問世,當(dāng)仁不讓!目前快速主要有“速測卡法”、“抑制率法”,前者一個(gè)樣品檢測費(fèi)通常在一兩元,后者則不超過十元(含人工、設(shè)備折舊、房租費(fèi)),且檢測量越大,成本越低。速測卡法操作簡單,只要像PH試紙一樣,將測試紙?jiān)谑卟藰悠飞喜翈紫,用手心的溫度培養(yǎng)幾分鐘,觀查測試紙的顏色變化,就可確定是否為農(nóng)藥陽性,可廣泛用于田間地頭,商販采購、大型食品加工、餐館等進(jìn)貨時(shí)的質(zhì)量把關(guān)用。而抑制率所用的設(shè)備主要是分光光度計(jì)、天平等,價(jià)值少則三五千,多則不過萬元的設(shè)備就可對(duì)大多數(shù)蔬菜、水果中的有機(jī)磷等農(nóng)藥殘留是否達(dá)到安全指標(biāo)做出準(zhǔn)確判定,通常一個(gè)熟練的操作人員30分鐘可檢測4、5個(gè)樣品,一兩小時(shí)可測出20余個(gè)樣品。
快速檢測用的酶是一種從蒼蠅頭部、或動(dòng)物如牛、雞的血清中提取物,稱為乙酰膽堿脂酶,對(duì)有機(jī)磷、安基甲酸酯類農(nóng)藥極為敏感,在一定條件下與樣本中的農(nóng)藥反應(yīng),可觀查到顏色的變化,或用分光光度計(jì)在412nm處檢測顏色的變化率,若顏色變化很快,宛若湖里的魚歡蹦亂跳,表明無毒,若顏色基本不變,活性被大大抑制,如水中的魚基本翻了肚子,則說明樣本中的農(nóng)藥殘毒高,引用抑制率進(jìn)行表述。以國標(biāo)為例,抑制率高于50%為不合格,標(biāo)準(zhǔn)注明與氣相色譜法檢測結(jié)果吻合率達(dá)80%以上。可以形象理解為,在一塘水池中養(yǎng)100條魚,若死率在50條以上,則可以判定水中有毒,不能飲用,具體是什么種類的毒藥雖不能定性一樣,抑制率法只能判定蔬菜水果中是否有高殘毒,可能是一種或多種農(nóng)殘總量貢獻(xiàn),但不能確定具體農(nóng)藥種類。人們重點(diǎn)關(guān)注的是能否食用,而不是農(nóng)藥種類!抑制率法經(jīng)濟(jì)、快速、高效,剛好解決了上述的不等式問題。
研究表明,原法中不嚴(yán)謹(jǐn)導(dǎo)致測量不穩(wěn)定,與其它檢測一樣,作為所提供的法律數(shù)據(jù),檢測需規(guī)范嚴(yán)謹(jǐn)。
筆者做了如下改進(jìn),1、制樣:干樣品如茶葉類要制成粉,蔬菜水果類水分高的要制成漿,保證樣品的勻一性;2、對(duì)提取的分析液增加快速定性濾紙過濾,使溶液清亮透明,因?yàn)V紙對(duì)緩沖液的吸附作用,所以改樣品中加5ml緩沖液為6ml,且在接過濾液的杯上事先畫好2.5ml刻度線,體積不足時(shí)再加少許緩沖液淋洗濾紙及樣品,確保分析液體積基本為2.5ml;3、37℃培養(yǎng)時(shí)若因培養(yǎng)箱或水浴加熱過程中蒸發(fā)濃縮的要用緩沖液補(bǔ)足2.5ml;4、對(duì)于色度過大的吸光度超過光度計(jì)讀數(shù)限量的,改1cm比色皿為0.5cm;5、出具法律用數(shù)據(jù)時(shí),取雙杯檢測平均值;6、比色時(shí)技巧及注意事項(xiàng):將培養(yǎng)畢的檢測液置入1cm或0.5cm比皿中讀取吸光度并記錄后,從加入底液起用秒表計(jì)時(shí),確保加底液后的顯色反應(yīng)為準(zhǔn)確的3分鐘;對(duì)批量樣品的檢測,測吸光度加底液時(shí),從第一個(gè)樣加入底液后起計(jì)時(shí),按10秒間隔時(shí)間按順序依次加入底液的,以便批量操作時(shí)能保證每個(gè)樣品的反應(yīng)時(shí)間準(zhǔn)確為3分鐘時(shí)能記錄下吸光度;根據(jù)操作人員自己的情況控制每次加底液的顯色杯數(shù),確保加底液后一分鐘后兩分半鐘內(nèi)能使每杯都能依次盡量搖勻。實(shí)踐證明改進(jìn)后的方法,重現(xiàn)性良好,測出抑制率大于50%以上的,不確定度小于7%,50%以下的不確定度小于5%,對(duì)標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)提到的除幾種有刺激性干擾的蔬菜外,完全能滿足仲裁需要,且與相應(yīng)的色譜圖比對(duì)極為吻合。若抑制率法得到廣泛應(yīng)用與認(rèn)可,或作為色譜法的篩查,對(duì)大幅節(jié)省檢測成本、經(jīng)費(fèi)支出有重大意義。
在此筆者還有一個(gè)建議,就是將每天食用量較少的,或非每天必食的農(nóng)產(chǎn)品,如水果類的不合格判定抑制率定為90%以上,與主食的蔬菜類的50%以下為合格予以分別對(duì)等待,這也符合國際通行做法,如美國農(nóng)藥限量中,規(guī)定甲基硫菌靈在蔬菜類時(shí)限量規(guī)定為0.1到1mmp左右,而在桃中限量為15,中國蔬菜限量為0.1左右,而水果則為3。
   關(guān)于改進(jìn)和大力推行“乙酰膽堿酯酶抑制率測定蔬菜水果農(nóng)殘”的建議.pdf

編輯:foodinfo

 
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