培養(yǎng)基的主要作用有兩方面:
①提供微生物生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì);
②培養(yǎng)基具有選擇性和差異性,可以選擇特定類(lèi)型的細(xì)菌或真菌進(jìn)行培養(yǎng),并區(qū)分不同種類(lèi)的微生物。
因此,在微生物檢驗(yàn)中,必須對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制,只有優(yōu)質(zhì)的培養(yǎng)基才能為微生物檢驗(yàn)提供精準(zhǔn)、可靠的檢測(cè)結(jié)果。
培養(yǎng)基的概述
培養(yǎng)基是用于保證微生物繁殖、鑒定、保持活力的物質(zhì),按照物理性質(zhì)可以分成液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和脫水培養(yǎng)基,按照化學(xué)性質(zhì)可以分成天然培養(yǎng)基、組合培養(yǎng)基和半組合培養(yǎng)基,按照功能可以分成選擇性培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基。不同培養(yǎng)基要求不同,保存方式也不同。在受熱、吸潮后,培養(yǎng)基極易被微生物污染或分解變質(zhì),需在避光、防潮、陰涼處儲(chǔ)存。
培養(yǎng)基的采購(gòu)驗(yàn)收
微生物檢驗(yàn)需使用大量培養(yǎng)基。為提高檢驗(yàn)效率,實(shí)驗(yàn)室多使用商品化即用型培養(yǎng)基、商品化脫水合成培養(yǎng)基。在培養(yǎng)基的采購(gòu)中,應(yīng)選擇國(guó)內(nèi)、外知名商家的產(chǎn)品,并向生產(chǎn)企業(yè)索要培養(yǎng)基成分名稱(chēng)、產(chǎn)品編號(hào)、批號(hào)、最終 pH 值、儲(chǔ)存條件、生產(chǎn)日期、有效期、質(zhì)控報(bào)告和必要的相關(guān)信息,以保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。在產(chǎn)品交貨驗(yàn)收時(shí),購(gòu)買(mǎi)者需對(duì)產(chǎn)品包裝的完整性、生產(chǎn)日期、有效期和產(chǎn)品合格證明等進(jìn)行核驗(yàn),檢查培養(yǎng)基的顏色、性質(zhì)等是否符合實(shí)驗(yàn)室相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),培養(yǎng)基檢驗(yàn)合格后進(jìn)行入庫(kù)登記。
培養(yǎng)基的制備
配制要求
正確按要求制備培養(yǎng)基是做好微生物檢驗(yàn)的基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)人員使用商品化脫水合成培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基時(shí),要嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明進(jìn)行配制,并做好配制記錄。在配制過(guò)程中,實(shí)驗(yàn)人員需要嚴(yán)格遵守相關(guān)操作標(biāo)準(zhǔn),佩戴口罩進(jìn)行操作,避免吸入含有有毒物質(zhì)的培養(yǎng)基粉末,稱(chēng)量、溶解應(yīng)使用專(zhuān)門(mén)的角匙,不使用金屬制品,避免金屬離子混入培養(yǎng)基,影響微生物生長(zhǎng);準(zhǔn)確稱(chēng)量后,應(yīng)先加入適量的水充分溶解,再加水至所需量進(jìn)行加熱,加熱中應(yīng)不斷攪拌,防止培養(yǎng)基在容器底部積聚;調(diào)節(jié)pH值,分裝到比培養(yǎng)基體積最少大 20% 的容器中,按說(shuō)明要求進(jìn)行滅菌。粉末狀態(tài)的培養(yǎng)基開(kāi)封后應(yīng)存放在陰涼干燥處,及時(shí)使用,環(huán)境濕度過(guò)大會(huì)使培養(yǎng)基出現(xiàn)受潮、結(jié)塊、污染等情況。對(duì)于瓊脂類(lèi)培養(yǎng)基,可采用沸水浴或流動(dòng)蒸汽的加熱方式進(jìn)行融化,但反復(fù)凍融只允許進(jìn)行1次。
配制用水
水是配制培養(yǎng)基不可或缺的一部分,一般使用純化水。還應(yīng)定期檢查培養(yǎng)基配制用水的微生物污染情況,應(yīng)符合純化水要求。