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色譜法及其分類

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2005-10-07

. 色譜法

    色譜法:根據(jù)各物質(zhì)在兩相中的分配系數(shù)(表示溶解 吸附的能力)不同而進(jìn)行分離、分析的方法。

    各組分被分離后,可進(jìn)一步進(jìn)行定性和定量分析:

經(jīng)典:分離過(guò)程和其含量測(cè)定過(guò)程是離線的,即不能連續(xù)進(jìn)行

現(xiàn)代:分離過(guò)程和其含量測(cè)定過(guò)程是在線的,即  能連續(xù)進(jìn)行

經(jīng)典色譜法:將潮濕的碳酸鈣擠出玻璃管,用刀將各色帶切下,用適宜的方法進(jìn)行分析;

現(xiàn)代色譜法:當(dāng)一個(gè)兩組分(AB)的混合物樣品在時(shí)間t1從柱頭加入,隨著流動(dòng)相不斷加入,洗脫作用連續(xù)進(jìn)行,直至AB組分先后流出柱子而進(jìn)入檢測(cè)

器,從而使各組分濃度轉(zhuǎn)變成電信號(hào)后在熒光屏上顯示出來(lái)。

根據(jù)峰的位置(出峰時(shí)間 t ——定性

根據(jù)峰的面積 A (或峰高h ——定量

. 色譜法分類

(一)按兩相物理狀態(tài)分

1.    氣相色譜法 (gas chromatography 簡(jiǎn)稱 GC)用氣體作流動(dòng)相的色譜法。

     2. 相色譜法 (liquid chromatography 簡(jiǎn)稱 LC)用液體作流動(dòng)的色譜法。

3. 超臨界流體色譜法  (SFC)

    用超臨界狀態(tài)的流體作流動(dòng)的色譜法。

    超臨界狀態(tài)的流體不是一般的氣體或 , 界壓力和界溫度以上高度壓縮的氣體 , 其密度比一般氣體大得多與液體相 , 故又稱為高密度氣相色譜法

(二)按分離原理分

1. 吸附色譜法 adsorption  chromatography ):

    根據(jù)吸附劑表面對(duì)不同組分物理吸附能力的強(qiáng)弱差異進(jìn)行分離的方法。

    氣一色譜法、液-色譜法——吸附色譜

2. 分配色譜法 partition  chromatography ):

    根據(jù)不同組分在固定相中的解能力和在兩相間分配系數(shù)的差異進(jìn)行分離的方法。

    -液色譜法、液-色譜法——分配色譜

3. 離子交換色譜法ion exchange chromatography

      根據(jù)不同組分離子對(duì)固定親和力的差異進(jìn)行分離的方法。

4. 排阻色譜法 size exclusion chromatography):

又稱凝色譜法 gel chromatography ,

    根據(jù)不同組分的分體積大小的差異進(jìn)行分離的方法

其中以水溶作流動(dòng)的稱為凝膠過(guò)濾色譜法 ;以有機(jī)溶劑作流動(dòng)的稱為凝滲透色譜法。

5. 親合色譜法 (affinity chromatography)

    利用不同組分與固定相共價(jià)鍵合的高專屬反應(yīng)進(jìn)行分離的方法。

(三)按固定相的形

1. 柱色譜法column chromatography ):

       固定相裝在柱中 , 試樣沿著一個(gè)方向移動(dòng)進(jìn)行分離

包括 填充柱色譜法:固定相填充滿玻璃管和金屬管中

       開(kāi)管柱色譜法:固定相固定在細(xì)管內(nèi)壁(毛細(xì)管柱色譜法)

 2. 色譜法 planer chromatography ):

        定相呈平面狀的色譜法。

包括  紙色譜法  以吸附水分的濾紙作固定相;

        薄層色譜法:以涂敷在玻璃板上的吸附劑作固定相。

 
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