李忠 蔣次清 施紅林 王嵐 楊光宇*1
（云南煙草科學(xué)研究院煙草化學(xué)室, 昆明市科醫(yī)路41號, 昆明650106）

測定煙草中揮發(fā)酚是煙草重要雜氣成分之一, 其含量與煙草質(zhì)量具有密切的相關(guān)性[1]，因此測定煙草及其制品中的揮發(fā)酚量具有重要意義。揮發(fā)酚的測定一般先采用水蒸汽蒸餾分離，然后用4-氨基安替比林比色測定, 傳統(tǒng)的水蒸汽蒸餾裝置測定揮發(fā)酚耗時(shí)長，分析準(zhǔn)確度、精密度差。為了能快速準(zhǔn)確地測定煙草及其制品中的揮發(fā)酚，我們研究了用新型自動水蒸汽蒸餾裝置蒸餾分離測定煙草及其制品中揮發(fā)酚的方法。該方法準(zhǔn)確度、精密度比傳統(tǒng)水蒸汽蒸餾方法有較大提高，且大大縮短了分析時(shí)間。

1 實(shí)驗(yàn)部分
1.1主要儀器和試劑
UV2400 紫外可見分光光度計(jì)（日本島津）;
 新型自動水蒸汽蒸餾裝置（瑞士Buchi公司），普通玻璃磨口水蒸汽蒸餾裝置。
苯酚標(biāo)準(zhǔn)儲備液：1mg/ml, 使用時(shí)稀釋成10mg/ml 標(biāo)準(zhǔn)工作液；pH 為10 緩沖溶液：稱取20g 氯化銨，用100ml濃氨水溶解，定容到500ml；
鐵氰化鉀溶液：稱取8g鐵氰化鉀, 用水溶解, 定容到100ml；
4-氨基安替比林溶液：稱取 2g 4- 氨基安替比林(C11H13ON3), 用水溶解，定容到100ml；
10％酒石酸；無酚蒸餾水：1000ml蒸餾水加入1g硫酸銅重蒸。
1.2實(shí)驗(yàn)方法
準(zhǔn)確稱取1g樣品于250ml燒瓶中，加入100ml 2.5mol/L 硫酸, 加熱回流1h，用30ml水沖洗冷凝管，把溶液轉(zhuǎn)入500ml蒸餾燒瓶，加入10ml 10％酒石酸，將蒸餾燒瓶接于水蒸汽蒸餾裝置上，分別用新型水蒸汽蒸餾裝置（蒸約8 分鐘）和普通水蒸汽蒸餾裝置（蒸約1 小時(shí)）蒸餾，收集約200ml餾份，轉(zhuǎn)入250ml分液漏斗中，加入5ml緩沖溶液，1ml 4-氨基安替比林溶液，1ml鐵氰化鉀溶液，混勻，放置10min, 準(zhǔn)確加入10ml氯仿， 振蕩 2min萃取有色產(chǎn)物，靜置分層，將氯仿放入10ml小試管中用無水硫酸鈉干燥，然后放入1cm比色皿于460nm處測吸光度。

2 結(jié)果與討論：
分別取玉溪中三（樣品I）、大理C1F（樣品II），昭通C2F（樣品III）用普通水蒸汽蒸餾裝置測定結(jié)果見表Ⅰ。
取上述三種樣品用新型水蒸汽蒸餾裝置蒸餾測定，結(jié)果見表Ⅱ。

2.1方法精密度比較
從表Ⅰ、表Ⅱ可看出，用新型水蒸汽蒸餾裝置蒸餾測定結(jié)果的RSD%明顯小于用普通水蒸汽蒸餾測定的結(jié)果。說明用新型水蒸汽蒸餾裝置測定的精密度明顯優(yōu)于普通水蒸汽蒸餾裝置。主要原因是用普通水蒸汽蒸餾裝置蒸餾時(shí)蒸汽流量波動大，不易控制，各樣品由于蒸汽流量不均勻(受電源和汽瓶水量變化影響大)導(dǎo)致總揮發(fā)酚蒸出不均勻，致使測定數(shù)據(jù)波動大。而用新型自動水蒸汽蒸餾裝置可準(zhǔn)確、穩(wěn)定地控制蒸汽流量，揮發(fā)酚蒸出非常均勻，測定結(jié)果精密度好。
2.2方法時(shí)間比較
從表Ⅰ和表Ⅱ可看出，用普通水蒸汽蒸餾裝置蒸餾一個樣品需要60 分鐘左右，而用新型自動水蒸汽蒸餾裝置只需要7.5分鐘左右，每個樣品可節(jié)約時(shí)間大約52 分鐘，大大縮短了分析時(shí)間。
2.3方法準(zhǔn)確性比較
從表Ⅰ和表Ⅱ可看出，和普通水蒸汽蒸餾裝置相比，用新型自動水蒸汽蒸餾裝置測定的結(jié)果回收率更好。主要原因是，使用普通水蒸汽蒸餾裝置，在操作過程中引入人為誤差大，而且裝置氣密性很難控制，蒸餾過程中會造成少量餾分沒有完全冷凝而以蒸汽形態(tài)揮發(fā)損失，從而引入測定誤差。新型自動水蒸汽蒸餾裝置從清冼到蒸餾均為自動控制，裝置氣密性好，可將人為誤差控制到最小，故測定結(jié)果準(zhǔn)確度更高、更可靠。

3 結(jié)論
從上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果可看出，用新型自動水蒸汽蒸餾裝置測定煙草中的揮發(fā)酚具有準(zhǔn)確、快速、精密度好的特點(diǎn)。它的使用將為煙草質(zhì)量檢驗(yàn)中快速、準(zhǔn)確地測定揮發(fā)酚提供有效保障。