我們以SN標(biāo)準(zhǔn)中的最近似值(MPN)測(cè)定法來(lái)進(jìn)行講解：

　　　附：MPN方法簡(jiǎn)介

　　這種方法適用于檢測(cè)認(rèn)為帶有大量競(jìng)爭(zhēng)菌的食品及其原料和未經(jīng)處理的食品中的少量金黃色 葡萄球菌。

1、樣品制備：

　　固體或半固體食品: 以無(wú)菌操作稱(chēng)取25g樣品,放入裝有225mL滅菌生理鹽水的滅菌均 質(zhì)杯內(nèi),于8000r/min均質(zhì)1～2min,制成1:10樣品勻液。
　　液體食品: 用滅菌吸管吸取25mL樣品,放入裝有225mL滅菌生理鹽水的滅菌玻璃瓶?jī)?nèi) (瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠),經(jīng)充分振搖制成1:10樣品勻液。
　　供計(jì)數(shù)檢驗(yàn)時(shí),可按十進(jìn)位遞增稀釋法將樣品勻液再進(jìn)行適當(dāng)稀釋。

2、選三個(gè)連續(xù)稀釋度，從每個(gè)稀釋度分別取1 mL稀釋樣品液，接種3管含10％氯化鈉還記得么？ 金黃色葡萄球菌有高度的耐鹽性，可在10-15%NaCl肉湯中生長(zhǎng)。 因此，這事實(shí)上是一種選擇性的增菌。胰蛋白胨大豆肉湯。樣品的最高稀釋度必須達(dá)到能獲得陰性終點(diǎn),置36±1℃培養(yǎng)48 h。

3、用3 mm接種環(huán),從有細(xì)菌生長(zhǎng)的各管中移取1 環(huán),劃線接種于表面干燥的Baird- Parker瓊脂平板,置36±1℃培養(yǎng)45～48h。

　　附：怎樣在平板上進(jìn)行細(xì)菌的劃線分離。

4、從有細(xì)菌生長(zhǎng)的每一平板上至少挑取1個(gè)可疑金黃色葡萄球菌菌落,移種到肉湯培養(yǎng)基中,置36±1℃培養(yǎng)20～24 h。

　　附：金黃色葡萄球菌在BP平板上的菌落形態(tài)-1
　　　　金黃色葡萄球菌在BP平板上的菌落形態(tài)-2
　　　　金黃色葡萄球菌在甘露醇高鹽平板上的菌落

5、取肉湯培養(yǎng)物0.3mL同0.5mL凝固酶試驗(yàn)兔血漿于8mm×100mm試管內(nèi)充分混合,置 36±1℃培養(yǎng),定時(shí)觀察是否有凝塊形成,至少觀察6 h,以?xún)?nèi)容物完全凝固,使試管倒置或 傾斜時(shí)不流動(dòng)者為陽(yáng)性。試驗(yàn)中需同時(shí)做巳知陽(yáng)性和陰性對(duì)照。對(duì)可疑結(jié)果,應(yīng)進(jìn)行革蘭氏染色、鏡檢和其他輔助試驗(yàn){如耐熱核酸酶試驗(yàn)等} 加以證實(shí)。

　　附：金黃色葡萄球菌血漿凝固酶試驗(yàn)

6、報(bào)告結(jié)果：根據(jù)凝固酶試驗(yàn)結(jié)果查最近似值(MPN)表,報(bào)告金黃色葡萄球菌 的MPN/g (mL)。

　　附：國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：GB/T4789.10-2008 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)　金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)

　　　 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)：SN0172-92：出口食品中金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)方法