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固相膜雜交|本底的排除

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-06
    “噪音”(noise)是固相膜雜交方法常遇到的問題,指標(biāo)記DNA結(jié)合到空白膜上的放射性計數(shù),即本底。這個問題的克服一是使用高純度的核酸制品和充分嚴(yán)格的雜交條件:二是選擇合適的雜交反應(yīng)液和對膜進(jìn)行處理。研究發(fā)現(xiàn),隨著離子強(qiáng)度的增加,空白膜(未固定DNA對照膜)上的“噪音”水平增加,而在50%甲酚胺6×SSC的雜交反應(yīng)液中充分封閉膜上的多余非特異結(jié)合位點(diǎn)。
 
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