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液相核酸分子吸附雜交

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-06
    1 HAP吸附雜交:羥基磷灰石(HAP)層析或吸附是液相雜交中最早使用的方法。在液相中雜交后,DNA:DNA雜交雙鏈在低鹽條件可特異地吸附到HAP上。通過離心使吸附有核酸雙鏈的HAP沉淀,再用緩沖液離心漂洗幾次HAP,然后將HAP置于計數(shù)器上進行放射性計數(shù)。
  2 親合吸附雜交:生物素標記DNA探針與溶液中過量的靶RNA雜交,雜交物吸附到酰化親合素包被的固相支持物(如小球)上,用特異性抗DNA:RNA雜交物的酶標單克隆抗體與固相支持物上的雜交物反應,加入酶顯色底物,這個系統(tǒng)可快速(2h)檢測RNA。
  3 磁珠吸附雜交:Gen – probe公司最近應用吖啶翁酯(acridinium ester)標記DNA探針,這種試劑可用更敏感的化學發(fā)光來檢測。探針和靶雜交后,雜交物可特異地吸附在磁化的有孔小珠(陽離子磁化微球體上)。溶液中的磁性小珠可用磁鐵吸出,經(jīng)過簡單的漂洗步驟,吸附探針的小珠可用化學發(fā)光測定。
 
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