分光光度計在我們?nèi)粘T噭╅_發(fā)中,是一臺必備的測量儀器,分光光度計是怎么使用的?下面就和大家一起聊聊它的使用技巧!1.使用儀器之前,一般要校正儀器,看看空白時透光率是否是100%。 2.比色皿應(yīng)該保持清潔,干燥。 如有污物,可用稀鹽酸清洗后,再用1:1的酒精與乙醚清洗涼干。禁止用硬物碰或擦透明表面;蛘呓ㄗh使用10%的鹽酸溶液浸泡,然后用無水乙醇沖洗2~3次。比色皿具有方向性,使用時要注意,仔細觀察比色皿上方應(yīng)該有一個箭頭標志的,代表入射光方向。注入和倒出溶液時,應(yīng)該選擇非透光面。最好使用配對的比色皿。 3.防止儀器振動,影響光學系統(tǒng)。 4.在開機狀態(tài),不測量時,應(yīng)該打開樣品池門,否則,影響光電傳感器壽命。 5.樣品集中測量,避免開機次數(shù),可延長光源壽命。 6.儀器工作穩(wěn)定性差,漂移大時,應(yīng)該考慮更換光源或光電元件。 7. 一般分光儀主要有光源部分、光路部分、檢測器三的部分,光路有的情況是穩(wěn)壓電源問題,鎢燈問題及鎢燈位置與光路不一致等問題。光路部分主要有比色皿不干凈,燈光與比色皿位置不合適(在正常情況下,比色皿位置放一張白紙,可以清楚看到光斑形狀呈顯矩形,屬于正常情況。對于檢測器大多數(shù)是正常的,但是光敏管或者光電管有時侯也會出現(xiàn)問題。 8.若峰出現(xiàn)很多“毛刺”,可能是掃描速度過快,濃度過高或者狹縫過; 9. 紫外分光光度計用來測紫外光時,石英皿用來調(diào)零時不穩(wěn)定,是由那些原因? 首先確定是否用成玻璃比色皿,判斷方法在紫外區(qū)任一波長下用空氣調(diào)零測比色皿的吸光度如果超過1ABS則比色皿用錯.再次用空氣調(diào)零看零點是否穩(wěn)定,如不穩(wěn)則是儀器問題,如空氣穩(wěn)定而放入石英皿后不穩(wěn)定,則檢查是否空白溶液吸光度太高,是否空白溶液藥品過期,或者空白溶液透明范圍不適合此波長測量比如甲醇在210NM以下吸光度很大無法調(diào)零。 10. 儀器狹縫寬度的選擇 狹縫的寬度會直接影響到測定的靈敏度和校準曲線的線性范圍。狹縫寬度過大時,入射光的單色光降低,校準曲線偏離比耳定律,靈敏度降低;狹縫寬度過窄時,光強變?nèi)酰瑒荼匾岣邇x器的增益,隨之而來的是儀器噪聲增大,于測量不利。選擇狹縫寬度的方法是:測量吸光度隨狹縫寬度的變化。狹縫的寬度在一個范圍內(nèi),吸光度是不變的,當狹縫寬度大到某一程度時,吸光度開始減小。因此,在不減小吸光度時的最大狹縫寬度,即是所欲選取的合適的狹縫寬度。 11. 紫外測量吸光度值不準,什么原因? (1).儀器調(diào)零后跳動大的話那可能是儀器有問題. (2).調(diào)零穩(wěn)定的話,看樣品濃度是否過高,最好控制在0-1個吸光度之間. (3).濃度合適的話,看是否比色皿沒擦干凈,一般可用蒸餾水沖洗一下,擦干后用鏡頭紙擦干凈. (4).檢查樣品是否穩(wěn)定,如果零點不變而放上樣品變化,那么是樣品有變化,檢查樣品是否有問題. 12.關(guān)于儀器維護 (1).儀器工作電源一般為220V,允許10%的電壓波動. (2).為了延長光源使用壽命,在不使時不要開光源燈. (3).單色器是儀器的核心部分,裝在密封盒內(nèi)不能拆開,為防止色散元件受潮發(fā)霉,必須經(jīng)常 更換蛋色器盒干燥劑. (4).必須正確使用吸收池,保護吸收池光學面. (5).光電轉(zhuǎn)換元件不能長時間暴光,應(yīng)避免強光照射或受潮積塵. 使用分光光度計都有什么注意事項? 1)為了防止光電管疲勞:不測定時必須將比色皿暗箱蓋打開,使光路切斷,以延長光電管使用壽命。 2)比色皿的使用方法:
①拿比色皿時:手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。
②清洗比色皿時:一般先用水沖洗,再用蒸餾水洗凈。如,比色皿被有機物沾污,可用鹽酸-乙醇混合洗滌液(1:2)浸泡片刻,再用水沖洗。不能用堿溶液或氧化性強的洗滌液洗比色皿,以免損壞。也不能用毛刷清洗比色皿,以免損傷它的透光面。每次做完實驗時,應(yīng)立即洗凈比色皿。
③比色皿外壁的水用擦鏡紙或細軟的吸水紙吸干:以保護透光面。
④測定有色溶液吸光度時:一定要用有色溶液洗比色皿內(nèi)壁幾次,以免改變有色溶液的濃度。另外,在測定一系列溶液的吸光度時,通常都按由稀到濃的順序測定,以減小測量誤差。
⑤在實際分析工作中:通常根據(jù)溶液濃度的不同,選用液槽厚度不同的比色皿,使溶液的吸光度控制在0.2~0.7。
①拿比色皿時:手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。
②清洗比色皿時:一般先用水沖洗,再用蒸餾水洗凈。如,比色皿被有機物沾污,可用鹽酸-乙醇混合洗滌液(1:2)浸泡片刻,再用水沖洗。不能用堿溶液或氧化性強的洗滌液洗比色皿,以免損壞。也不能用毛刷清洗比色皿,以免損傷它的透光面。每次做完實驗時,應(yīng)立即洗凈比色皿。
③比色皿外壁的水用擦鏡紙或細軟的吸水紙吸干:以保護透光面。
④測定有色溶液吸光度時:一定要用有色溶液洗比色皿內(nèi)壁幾次,以免改變有色溶液的濃度。另外,在測定一系列溶液的吸光度時,通常都按由稀到濃的順序測定,以減小測量誤差。
⑤在實際分析工作中:通常根據(jù)溶液濃度的不同,選用液槽厚度不同的比色皿,使溶液的吸光度控制在0.2~0.7。