5mL到25mL，再取10mL到25mL，再取10mL到25mL，這樣會不會誤差很大？

個人建議稀釋次數(shù)越多，造成的誤差越大：
如果濃度不要求特別嚴格的話，直接取3mL→100mL配制；
如果要求嚴格，可使用移液槍或3mL和0.2mL的大肚移液管配合使用一次性稀釋：3.2mL→100mL。
大多數(shù)偏向稀釋兩次:5mL-25mL,4mL-25mL

最好中間步驟越少越好。
●稀釋100倍：三種方式

1）1mL稀釋至100mL:

比如用1mL單標線吸量管，允許差A級是±0.007mL，B級是±0.015mL，用刻度吸量管，A級是±0.008mL，B級是±0.015mL。若不考慮讀數(shù)、溫度引起的液體膨脹、體積校正值修約誤差帶來的影響，僅考慮量器校準引起的不確定度分量，按均勻分布，其相對標準不確定度分別為0.404%、0.866%、0.462%、0.866%。
100mLA級容量瓶定容產(chǎn)生的不確定度分量僅考慮校準體積帶來的影響，允許差為±0.10mL，按均勻分布，其相對標準不確定度為0.0577%合成以上兩項，合成相對標準不確定度分別為0.408%、0.868%、0.465%、0.868%。
2）10毫升稀釋至1000mL:用10mL單標線吸量管，允許差A級是±0.020mL，B級是±0.040mL，用刻度吸量管，A級是±0.050mL，B級是±0.10mL。若不考慮讀數(shù)、溫度引起的液體膨脹、體積校正值修約誤差帶來的影響，僅考慮量器校準引起的不確定度分量，按均勻分布，其相對標準不確定度分別為0.115%、0.231%、0.289%、0.577%。1000mLA級 容量瓶定容產(chǎn)生的不確定度分量僅考慮校準體積帶來的影響，允許差為±0.40mL，按均勻分布，其相對標準不確定度為0.0231%合成以上兩項，合成相對標準不確定度分別為0.117%、0.232%、0.290%、0.577%
3）10毫升稀釋至100毫升，再取10毫升稀釋至100毫升：

用10mL單標線吸量管，允許差A級是±0.020mL，B級是±0.040mL，用刻度吸量管，A級是±0.050mL，B級是±0.10mL。其相對標準不確定度分別為0.115%、0.231%、0.289%、0.577%100mLA級容量瓶定容產(chǎn)生的其相對標準不確定度為0.0577%合成以上兩項分別為：0.129%、0.238%、0.295%、0.580%第二次稀釋同第一次，因此逐級稀釋產(chǎn)生的合成相對標準不確定度為：0.182%、0.337%、0.417%、0.820%。

●稀釋操作建議

建議稀釋時全部使用A級量器。

用1mLA級刻度吸量管稀釋至100毫升和10mLA級刻度吸量管稀釋至100毫升

兩次稀釋合成相對不確定度分別為0.465%和0.417%，相差不大。
比較以上數(shù)據(jù)即可發(fā)現(xiàn)：用10mLA級單標線吸量管稀釋至1000mL產(chǎn)生的相對不確定度分量最小。其次是10mLA級單標線吸量管稀釋至100mLA級容量瓶兩次逐級稀釋。再次是10mLB級單標線吸量管稀釋至1000mLA級容量瓶。